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ELISA試劑盒的標本如何融凍?

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       ELISA試劑盒以其特重復性好、異性強、敏感性高等優(yōu)點,在科研中深受各大科研工作者的喜愛。ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的關鍵組分、抗體對有關,若抗體對中之一為多抗,另一個必須為單抗,建議使用雙單抗。ELISA試劑盒的靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的較低量的能力,用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標的量選擇合適的試劑盒,如果待檢指標量很低,一般的試劑盒不能滿足要求,可選擇高敏的ELISA試劑盒。
  ELISA試劑盒標本的重復凍融所發(fā)作的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發(fā)作損壞作用,然后導致假陰性作用。凍融標本的混勻亦應留心,不要進行劇烈振蕩,重復倒置混勻即可。標本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所構成的的混濁或絮狀物時,應離心堆積后取上清查看。一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作符號的測定辦法發(fā)作非特異性攪擾。血清標本如是以無菌操作分別,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則主張冰凍保存。
  ELISA試劑盒要留心避免出現(xiàn)嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有相似過氧化物的活性。在以HRP為符號酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。樣本的搜集及血清分別中要留心盡量避免細菌污染,一則細菌的成長,其所排泄的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發(fā)作分解作用。樣本的長時間保存,應在-70℃以下。ELISA試劑盒冰凍保存的血清標本須留心避免因停電等構成的重復凍融。
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